(Áramlási citometria, FCM) egy sejtanalizátor, amely méri a festett sejtmarkerek fluoreszcencia intenzitását. Ez egy csúcstechnológiai technológia, amelyet az egyes sejtek elemzése és rendezése alapján fejlesztettek ki. Gyorsan mérheti és osztályozhatja a sejtek méretét, belső szerkezetét, DNS -jét, RNS -t, fehérjékét, antigénekét és egyéb fizikai vagy kémiai tulajdonságait, és alapulhat ezen osztályozások gyűjteményén.
Az áramlási citométer főként a következő öt részből áll:
1 áramlási kamra és folyékony rendszer
2 lézer fényforrás és gerendaformáló rendszer
3 optikai rendszer
4 Elektronika, tároló, megjelenítési és elemző rendszer
5 cellás válogatási rendszer
Közülük a lézer -lézer -gerjesztés a lézeres fényforrás és a gerenda formáló rendszerben a fluoreszcencia jelek fő mérése az áramlási citometriában. A gerjesztő fény intenzitása és az expozíciós idő a fluoreszcencia jel intenzitásához kapcsolódik. A lézer egy koherens fényforrás, amely egy hullámhosszúságot, nagy intenzitású és nagy stabilitású megvilágítást biztosíthat. Ideális gerjesztő fényforrás az e követelmények teljesítéséhez.
Két hengeres lencsé van a lézerforrás és az áramlási kamra között. Ezek a lencsék egy lézernyalábot fókuszálnak, amelynek kör alakú keresztmetszete a lézerforrásból elliptikus sugárba kerül, kisebb keresztmetszettel (22 μm × 66 μm). A lézerenergia ezen elliptikus sugáron belül egy normál eloszlás szerint oszlik meg, biztosítva a lézer -detektálási területen áthaladó sejtek következetes megvilágítási intenzitását. Másrészt az optikai rendszer több lencsékből, csapokból és szűrőkből áll, amelyek nagyjából két csoportra oszthatók: az áramlási kamra felfelé és lefelé.
Az áramlási kamra előtti optikai rendszer lencséből és lyukból áll. A lencse és a lyuk fő funkciója (általában két lencse és egy pinlyuk) az, hogy a lézernyalábot a lézerforrás által kibocsátott kör alakú keresztmetszettel fókuszáljuk egy kisebb keresztmetszetű ellipszis-gerenda-ba. Ez eloszlatja a lézerenergiát egy normál eloszlás szerint, biztosítva a sejtek következetes megvilágítási intenzitását a lézer -detektálási területen, és minimalizálja a kóbor fény interferenciáját.
Három fő típusú szűrő van:
1: Hosszú passz szűrő (LPF) - Csak lehetővé teszi a fényt, amelynek hullámhossza magasabb, mint egy adott érték, amely átjuthat.
2: Rövid áteresztési szűrő (SPF) - csak egy adott érték alatti hullámhosszúságú fényt enged.
3: A BandPass szűrő (BPF) - csak egy adott hullámhossz -tartományban a fény áthaladhat.
A szűrők különböző kombinációi a fluoreszcencia jeleket különböző hullámhosszon irányíthatják az egyes fotomultiplier csövekre (PMT). Például a zöld fluoreszcencia (FITC) kimutatására szolgáló szűrők a PMT előtt az LPF550 és a BPF525. A narancsvörös fluoreszcencia (PE) kimutatására használt szűrők a PMT előtt az LPF600 és a BPF575. A vörös fluoreszcencia (CY5) kimutatására szolgáló szűrők a PMT előtt az LPF650 és a BPF675.
Az áramlási citometriát elsősorban a sejtek válogatásához használják. A számítógépes technológia fejlődésével, az immunológia fejlesztésével és a monoklonális antitest -technológia feltalálásával a biológiában, az orvostudományban, a gyógyszertárban és más területeken való alkalmazásai egyre szélesebb körben elterjedtek. Ezek az alkalmazások magukban foglalják a sejtdinamikai elemzést, a sejtek apoptózisát, a sejtek tipizálását, a tumor diagnosztizálását, a gyógyszer hatékonysági elemzését stb.
A postai idő: szeptember-21-2023
